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產(chǎn)品型號:
所屬分類:人源細胞(含STR鑒定)
產(chǎn)品時間:2023-12-21
簡要描述:人頸靜脈球瘤細胞永生化我公司以客戶為核心,以產(chǎn)品質(zhì)量求生存,以售后服務求信譽。我們通過不斷改進來提高效率,絕不以犧牲品質(zhì)作為代價?!罢\信、創(chuàng)新、嚴謹、專業(yè)"愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作,共創(chuàng)輝煌!
細胞名稱:人頸靜脈球瘤細胞永生化
培養(yǎng)條件:腫瘤細胞培養(yǎng)體系
生長狀態(tài):貼壁生長
備注:原代細胞永生化,提供免疫熒光鑒定報告
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人源 II型肺泡上皮細胞
人源 氣管上皮細胞
人源 氣管平滑肌細胞
人源 支氣管上皮細胞
人源 支氣管平滑肌細胞
人源 肺成纖維細胞
人源 肺動脈內(nèi)皮細胞
人源 肺動脈平滑肌細胞
人源 心肌細胞
人源 主動脈內(nèi)皮細胞
人源 心肌成纖維細胞
人源 心臟微血管內(nèi)皮細胞
人源 主動脈瓣膜間質(zhì)細胞
人源 冠狀動脈內(nèi)皮細胞
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人源 頸動脈內(nèi)皮細胞
人源 頸動脈平滑肌細胞
人源 食管上皮細胞
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人源 胃成纖維細胞
人源 小腸粘膜上皮細胞
人源 小腸平滑肌細胞
人源 小腸成纖維細胞
人源 結(jié)腸粘膜上皮細胞
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人源 膽囊上皮細胞
人源 肝內(nèi)膽管上皮細胞
人源 肝外膽管上皮細胞
人源 肝實質(zhì)細胞
人源 肝星狀細胞
人源 肝竇內(nèi)皮細胞
人源 肝Kuffer細胞
人源 直腸成纖維細胞
人源 肝成纖維細胞
人源 直腸上皮細胞
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人源 膽囊微血管內(nèi)皮細胞
人源 膽囊成纖維細胞
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人源 膽囊動脈內(nèi)皮細胞
人源 食管癌細胞
人源 食管纖維瘤細胞
人源 腎小管上皮細胞
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人源 腎小球內(nèi)皮細胞
人源 腎足細胞
人源 輸尿管上皮細胞
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人源 前列腺上皮細胞
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人源 胰腺星狀細胞
人源 胰島細胞
人源 腎上腺皮質(zhì)細胞
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人源 扁桃體動脈內(nèi)皮細胞
人源 扁桃體動脈平滑肌細胞
人源 腮腺腫瘤細胞
人源 扁桃體間質(zhì)細胞
人源 頜下腺囊腫細胞
人源 甲狀腺微血管內(nèi)皮細胞細胞培養(yǎng)問題----沉淀
當排除了污染后,細胞培養(yǎng)基的渾濁通常可以解釋為金屬、蛋白質(zhì)和其他培養(yǎng)基成分的沉淀。沉淀物可能對細胞健康有害,因為他們可能通過整合作用等過程去除營養(yǎng)物質(zhì)和其他需要的成分,從而改變培養(yǎng)基成分。
沉淀的原因
溫度變化
溫度是細胞培養(yǎng)中沉淀的主要原因之一。當暴露于端溫度變化時,高分子量的血漿蛋白會從溶液中沉降。熱失活和凍融循環(huán)會促進蛋白質(zhì)的變性和沉淀。由于液體或復溶培養(yǎng)基在每次使用之間保持冷藏狀態(tài),鹽可能會沉淀出來,特別是10倍或其他濃縮液中析出。
失水引起的濃度變化
如果培養(yǎng)基存在蒸發(fā),培養(yǎng)基組分(包括鹽)的濃度將增加。在培養(yǎng)基的表面特別容易形成晶體沉淀。
鈣鹽
在制備無血清培養(yǎng)基時,組分的添加順序可能會導致不溶性分子的形成。鈣鹽特別容易沉淀。例如,CaCl2和MgSO4在溶液中反應形成CaSO4晶體。高壓滅菌和pH值不穩(wěn)定可能會加劇這一問題。
金屬元素補充劑
銅、鐵和鋅金屬元素是細胞生長所必需的,是無血清培養(yǎng)基的重要補充劑。其他血清成分的缺失可能會導致這些金屬在培養(yǎng)基中沉淀,產(chǎn)生一個對細胞有毒的環(huán)境。銅和鋅在氧化條件下更加容易沉淀。
污染
培養(yǎng)基渾濁可能是細菌或真菌污染造成的。
細胞培養(yǎng)中對沉淀的故障排除
溫度
有關培養(yǎng)基的最佳儲存和處理,應參閱制造商指南。避免重復的凍融循環(huán)。
鈣鹽
在逐個加入其他培養(yǎng)基組分之前,先將CaCl2單獨溶解在去離子水中。
濕度
確保燒瓶和培養(yǎng)皿不存在蒸發(fā)。監(jiān)測培養(yǎng)箱的濕度,密封培養(yǎng)器皿,防止干燥。
其他金屬
加入鐵結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白可防止鐵在培養(yǎng)基中沉淀。
污染
丟棄被污染的細胞并對培養(yǎng)箱體進行消毒。遵循良好的實驗室措施以避免污染。
有目的的沉淀
盡管通常在細胞培養(yǎng)中不希望有沉淀,但是沉淀可以用作上清液中蛋白質(zhì)的純化策略。例如,硫酸銨沉淀法有時被稱為“鹽析"技術,用于從雜交瘤上清液或血清中純化抗體。
細胞培養(yǎng)做為生物學研究最基礎的技術之一,可以說是滲透科研界的方方面面。工欲善其事,必先利其器。細胞好不好,就看你懂不懂細胞培養(yǎng)的各種技術了。
? 原代培養(yǎng)
從原代組織中分離細胞的常用的方法是酶解法(胰蛋白酶和膠原酶)。
用無菌的解剖刀和剪子將組織剪成3~4mm小片,用平衡液(無鈣鎂離子)清洗組織碎片后去除上清液,并加入0.25%的胰蛋白酶(Trypsin,100mg組織加入1ml胰蛋白酶)或者膠原酶(Collagenase,50~200單位/ml),孵育4-18h。離心取上清后,用平衡液清洗幾次后,用*培養(yǎng)基懸浮細胞,進行培養(yǎng)。
? 傳代培養(yǎng)
依據(jù)細胞生長的特點,傳代方法有3種:
1. 懸浮生長細胞傳代(離心法)
將懸浮細胞離心(1000 rpm, 3 min)去上清,收集沉淀物加新培養(yǎng)基,混勻后進行傳代培養(yǎng)。
2. 半懸浮生長細胞傳代(直接吹打法)
3.此類細胞(如Hela細胞)部分貼壁,但黏貼不牢,可用直接吹打法使細胞從瓶壁上脫落下來,進行傳代。
3. 貼壁生長細胞傳代(酶消化法)
去除瓶內(nèi)培養(yǎng)液后,加入1-2ml 0.25%的胰蛋白酶液(以消化液覆蓋整個瓶底為準)37℃靜置2-10min(顯微鏡下動態(tài)監(jiān)測)。移去蛋白酶液,加入培養(yǎng)液反復吹打瓶壁細胞,離心將細胞沉淀用培養(yǎng)液制成細胞懸液。吸取1/10—1/40細胞懸液,接種于含有適量新鮮培養(yǎng)液的新培養(yǎng)瓶中進行傳代培養(yǎng)。
......
細胞培養(yǎng)是一個不斷進步的過程,在平時做好積累,量變才會有質(zhì)變。
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