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人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H524

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H524

產(chǎn)品型號(hào): NCI-H524

所屬分類:熱賣細(xì)胞

產(chǎn)品時(shí)間:2023-12-20

簡(jiǎn)要描述:人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H524
我司主要經(jīng)營(yíng)產(chǎn)品是國(guó)內(nèi)傳代細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無(wú)外泌體血清等高品質(zhì)血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無(wú)血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒等產(chǎn)品。售后完善,我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購(gòu)!

詳細(xì)說(shuō)明:

產(chǎn)品名稱:人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H524    

細(xì)胞規(guī)格:1-3×10^6細(xì)胞量

庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨

培養(yǎng)RPMI-1640+ 10% FBS

運(yùn)輸方式:常溫順豐運(yùn)輸和干冰順豐運(yùn)輸

貨 期:復(fù)蘇細(xì)胞需要1-2周,凍存細(xì)胞的需要3-5天(特殊情況會(huì)有說(shuō)明)

質(zhì) 控:無(wú)支原體、無(wú)污染、符合標(biāo)準(zhǔn)

研究范圍:僅供科研使用

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H524     

我司主要經(jīng)營(yíng)產(chǎn)品是國(guó)內(nèi)傳代細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無(wú)外泌體血清等高品質(zhì)血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無(wú)血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒等產(chǎn)品。售后完善,我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購(gòu)!

我司以客戶為核心,以產(chǎn)品質(zhì)量求生存,以售后服務(wù)求信譽(yù)。我們通過(guò)不斷改進(jìn)來(lái)提高效率,絕不以犧牲品質(zhì)作為代價(jià)。“誠(chéng)信、創(chuàng)新、嚴(yán)謹(jǐn)、專業(yè)”愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作,共創(chuàng)輝煌!

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

1. 剪切組織 先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。

2. 消化分離 消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。

3. 培養(yǎng) 細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 細(xì)胞/毫升,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長(zhǎng),可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長(zhǎng)滿瓶壁,進(jìn)行傳代。

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

(1)無(wú)菌操作:細(xì)菌或霉菌污染是培養(yǎng)失敗的常見原因,必須加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的無(wú)菌操作觀念,以預(yù)防為主,一旦污染,一般很難消除。

(2)培養(yǎng)液:所用的培養(yǎng)液必須滿足細(xì)胞生存和生長(zhǎng)的必要條件。由于細(xì)胞來(lái)源的動(dòng)物種類、組織類型不同,對(duì)培養(yǎng)液的要求有一定的差異,必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

(3)血清:血清對(duì)于維持培養(yǎng)細(xì)胞的生存和促進(jìn)細(xì)胞增殖起著關(guān)鍵性作用。可選擇多種不同批號(hào)的血清進(jìn)行小樣分析。一旦確定某一廠家的某一批號(hào)血清后,就保持應(yīng)用至實(shí)驗(yàn)完成。

(4)膠原酶溶液:必須新鮮配制,貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(即使是-20℃低溫保存),也將影響消化效力,導(dǎo)致消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),細(xì)胞損傷增加。

(5)L-谷氨酰胺:幾乎所有細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺都有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞會(huì)因生長(zhǎng)不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,加有谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱貯存兩周以上時(shí),就應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺。

(6)靜置培養(yǎng):原代細(xì)胞在消化分離后,置于CO2培養(yǎng)箱的頭24~48h (必要時(shí)72h)內(nèi),應(yīng)處于靜置狀態(tài),切忌不時(shí)地取出培養(yǎng)瓶觀察生長(zhǎng)狀況,這將使原代分離細(xì)胞難以貼壁,更談不上伸展和增殖,初學(xué)者尤應(yīng)注意。不必?fù)?dān)心培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)消耗光,在細(xì)胞增殖之前對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求并不大。原代培養(yǎng)初期僅加一薄層培養(yǎng)液的目的也在于有利于細(xì)胞貼壁伸展。

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中*的除了培養(yǎng)基,胰酶也是非常重要的一個(gè)角色,雖然細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)基本技術(shù)大同小異,每種細(xì)胞的培養(yǎng)條件各不相同,但是,在細(xì)胞傳代過(guò)程中都少不了這個(gè)步驟—胰酶消化。

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中為什么要使用胰酶呢?胰酶的作用是什么?

胰酶是一種蛋白酶,酶切位點(diǎn)是肽鏈的Lys或Arg兩個(gè)殘基的羧基端肽鏈,通過(guò)在特定位置上降解蛋白,使細(xì)胞膜上與培養(yǎng)皿壁結(jié)合處蛋白降解,從而使兩者分離。這時(shí),細(xì)胞由于自身內(nèi)部細(xì)胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力可成為球形。

使用胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞,在使用胰酶消化時(shí)發(fā)現(xiàn)血清可以終止此過(guò)程,這是什么原因?

血清終止的原理其實(shí)是競(jìng)爭(zhēng)抑制,就是用過(guò)量的牛血清中含有的蛋白和胰酶結(jié)合,使胰酶失去消化細(xì)胞蛋白的機(jī)會(huì)。

為什么使用了胰蛋白酶消化,細(xì)胞還是成團(tuán)的,這可能是什么原因?qū)е碌模?/span>

消化時(shí)間不夠 ② 吹打力度不夠 ③ 胰酶消化液濃度不夠 ④ 細(xì)胞密度過(guò)高之后才消化傳代 ⑤ 胰酶存儲(chǔ)不當(dāng),或者使用了過(guò)期胰酶

胰酶分裝凍存時(shí)要注意什么?

胰酶分裝時(shí)盡量分裝成多瓶,并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因?yàn)槔鋬霰4鏁r(shí)體積會(huì)膨脹,多次使用同一瓶胰酶反復(fù)凍融會(huì)降低消化效果并增大污染的可能性。

怎么才能判斷胰酶消化*?

注意:不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才表示消化好了。

一般肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙狀移動(dòng)就可以了,就應(yīng)該停止消化。

胰酶適用于哪些細(xì)胞消化?它的消化效果與哪些有關(guān)呢?

胰酶適用于消化細(xì)胞間質(zhì)較少的軟組織和傳代細(xì)胞,如胚胎、上皮、肝、腎等組織,但對(duì)纖維性組織和較硬的癌組織效果較差。胰酶的消化效果主要與pH值、溫度、胰酶濃度、組織塊大小和硬度有關(guān)。

胰酶中的酚紅有哪些作用?

酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為pH指示劑,中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。研究表明:酚紅可以模擬固醇類激素(特別是雌激素)的作用。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),建議用不含酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè),在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí),也會(huì)使用不含酚紅的培養(yǎng)基或者胰酶。

在做細(xì)胞凋亡檢測(cè)時(shí),細(xì)胞為什么不能用含有EDTA的胰酶消化?

Annexin V(膜聯(lián)蛋白)是Ca2+依賴的蛋白,EDTA會(huì)螯合Ca2+從而影響Annexin V,進(jìn)而影響結(jié)果,因此需選用不含EDTA的胰酶。建議放入培養(yǎng)箱中進(jìn)行消化,時(shí)間可以長(zhǎng)一點(diǎn)。隨時(shí)觀察細(xì)胞情況,避免消化過(guò)度;也可使用細(xì)胞刮刀將細(xì)胞刮下,后用槍吹勻,比消化簡(jiǎn)單,還可避免使用胰酶帶來(lái)的傷害。

 

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LOVO/ADR人結(jié)腸癌細(xì)胞阿霉素耐藥株

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MCF-7/DDP人乳腺癌細(xì)胞順鉑耐藥株

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SGC7901/DDP人胃癌細(xì)胞順鉑耐藥株

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B16 小鼠黑色素瘤細(xì)胞

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LOVO 人結(jié)腸癌細(xì)胞

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Hyclone胎牛血清 Sv30087.02

Hyclone胎牛血清 SH30084.03

Hyclone優(yōu)等胎牛血清 SH30406.02

Hyclone優(yōu)等胎牛血清 SH30406.05

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Hyclone特級(jí)胎牛血清 SH30070.03E

Hyclone胎牛血清 SH30370.03

活性炭/葡聚糖胎牛血清 SH30068.03

活性炭/葡聚糖處理胎牛血清,熱滅活 SH30068.03HI

馬血清SH30074.03

烏拉圭胎牛血清 SV30087. 03

Hyclone胎牛血清SH30071.03

Hyclone胎牛血清SV30160.03

胎牛血清FBS SFBS

新生牛血清 SNCS

PAA 普通胎牛血清FBS A15-101

PAA 優(yōu)等胎牛血清FBS A15-151

BI優(yōu)等胎牛血清 04-001-1ACS

BI ES級(jí)別胎牛血清 04-002-1A

BI 間充質(zhì)胎牛血清 04-400-1A

Corning胎牛血清 35-076-CV

PAN胎牛血清FBS P30-3302

PAN胎牛血清FBS ST30-3302

PAN ES級(jí)別胎牛血清 ST30-2602

PAN胎牛血清FBS Plus ST30-3302P

NTC優(yōu)等胎牛血清 SFBE

Gemini優(yōu)等胎牛血清 900-108

Gemini特級(jí)胎牛血清 100-500

Gemini科研用人AB血清100-512

TCB胎牛血清 101ZC

Sigma 特級(jí)胎牛血清 F2442

Sigma正常人AB血清 H4522

SBI 無(wú)外泌體血清 EXO-FBS-50A-1

胎牛血清10270106、10099-141、10091-148、10099-133、10100-147、16010159、A31608-02、16050-122、30067334、10437-028等優(yōu)質(zhì)胎牛血清

雙抗 15140-122SV30010

胰酶 25200-056、SH30042.01

GIBCO 胰酶 25200-072

DMEM高糖培養(yǎng)基 C11995500BT

DMEM低糖培養(yǎng)基 C11885500BT

PBS C10010500BT

1640培養(yǎng)基 C11875500BT

DMEM/F12 C11330500BT

MEM培養(yǎng)基 C11095500BT

α-MEM C12571500BT

DMEM低糖 SH30021.01

DMEM高糖 SH30022.01SH30243.01

DMEM/F-12 1:1 SH30023.01

MEM/EBSS SH30024.01

PBS緩沖液 SH30256.01

α-MEM SH30265.01

RPMI-1640 SH30809.01

DPBS SH30028.02



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