產(chǎn)品名稱：人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞NCM460

貨號：QS-H110

細(xì)胞規(guī)格：1-3×10^6細(xì)胞量

庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨

培養(yǎng)液：90%DMEM/F12+10%FBS

凍存條件：80%*培養(yǎng)液+10%FBS+10%DMSO

運(yùn)輸方式：常溫順豐運(yùn)輸和干冰順豐運(yùn)輸

貨 期：復(fù)蘇細(xì)胞需要1-2周，凍存細(xì)胞的需要3-5天（特殊情況會有說明）

質(zhì) 控：無支原體、無污染、符合標(biāo)準(zhǔn)

研究范圍：僅供科研使用

我司是一家專注于生命科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè)，在廣大用戶的幫助和支持下，經(jīng)過不懈的努力，已成為國內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一，一站式采購商城，代理亞洲、歐美國家300多種品牌，200萬種以上產(chǎn)品。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國，在同行獲得*。

人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞NCM460 

我司主要經(jīng)營產(chǎn)品是國內(nèi)傳代細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無外泌體血清等高品質(zhì)血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒等產(chǎn)品。售后完善，我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購！

我司以客戶為核心，以產(chǎn)品質(zhì)量求生存，以售后服務(wù)求信譽(yù)。我們通過不斷改進(jìn)來提高效率，絕不以犧牲品質(zhì)作為代價。“誠信、創(chuàng)新、嚴(yán)謹(jǐn)、專業(yè)”愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作，共創(chuàng)輝煌！

細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，由于不同細(xì)胞來源不同的組織器官環(huán)境，其體外培養(yǎng)所需的養(yǎng)分不盡相同，選擇合適的培養(yǎng)基對細(xì)胞的培養(yǎng)至關(guān)重要。

按培養(yǎng)基的來源可分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基（目前使用的培養(yǎng)基絕大部分是合成培養(yǎng)基）。按其物質(zhì)狀態(tài)可分為干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類，干粉培養(yǎng)基需由實驗者自己配制并滅菌（可靈活配制配比），液體培養(yǎng)基由專業(yè)商家提供（用戶可直接使用，非常方便）。

合成培養(yǎng)基成分

主要成分有：氨基酸、碳水化合物、無機(jī)鹽、維生素及其它輔助物質(zhì)。

氨基酸：是組成蛋白質(zhì)的基本單位。不同種類的細(xì)胞對氨基酸的要求各異，但有幾種氨基酸細(xì)胞自身不能合成，必須依靠培養(yǎng)液提供，這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺時，細(xì)胞生長不良而死亡。因此，各種培養(yǎng)液中都有較大量的谷氨酰胺。但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培養(yǎng)液內(nèi)。已含谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲存2 周以上時，還應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。

維生素：在細(xì)胞培養(yǎng)中，盡管血清是維生素重要來源，但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細(xì)胞系生長。

碳水化合物：是細(xì)胞生長主要能量來源，其中有的是合成蛋白質(zhì)和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等。

無機(jī)鹽：培養(yǎng)液中無機(jī)鹽的主要功能是幫助細(xì)胞維持滲透壓平衡。此外，通過提供鈉，鉀和鈣離子，幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能。培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素,細(xì)胞通?？赡褪?60mOsm/kg～320 mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動。特別注意：向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓，特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加HEPES 時需按以下“緩沖系統(tǒng)”方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。

緩沖系統(tǒng)：大多數(shù)細(xì)胞所需pH 在7.2 - 7.4。但是，細(xì)胞培養(yǎng)zui適pH 值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類不同而不同。成纖維細(xì)胞喜歡較高pH (7.4 - 7.7), 而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH (7.0 - 7.4)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2 體系進(jìn)行緩沖，因此，氣相中的CO2 濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2 濃度設(shè)定在5％，培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為1.97g/L；如果CO2 濃度維持在10％，培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為3.95g/L。同時，細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊，以保證氣體交換。HEPES 是一種非離子緩沖液，在pH 7.2 - 7.4 范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時對一些細(xì)胞可能有毒。HEPES 緩沖液可與低水平的碳酸鈉（0.34g/L）共用，以抵消因額外加入HEPES 引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下，細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色。

其它成分：

在一些較為復(fù)雜的培養(yǎng)液中還包括其它一些成分，如：

（1）非必需氨基酸：有些細(xì)胞需要額外添加。

（2）丙酮酸鈉：是糖酵解的中間產(chǎn)物，可直接進(jìn)出細(xì)胞，作為替代碳源添加。

（3）胰島素：可以促進(jìn)細(xì)胞增殖。

（4）qing化可的松：可促進(jìn)表皮細(xì)胞生長。
（5）IL-2：促進(jìn)淋巴細(xì)胞生長，NK92依賴等。

（6）地塞米松：激素類，促進(jìn)部分細(xì)胞生長。

（7）腎上腺素：促進(jìn)部分細(xì)胞生長。

（8）轉(zhuǎn)鐵蛋白：為細(xì)胞內(nèi)化和細(xì)胞代謝提供所需的鐵。

（9）2-qiu基乙chun（2-Mercaptoethanol，2-Me）：2-Me的活性部分是硫氫基，其中一個重要作用是使血清中含硫的化合物還原成谷胱甘肽，能誘導(dǎo)細(xì)胞的增殖，為非特異性的激活作用。另一個重要作用是促進(jìn)分裂原的反應(yīng)和DNA 合成，增加植物凝集素(PHA)對淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用。

液體培養(yǎng)基保存

液體培養(yǎng)基應(yīng)于4℃冰箱避光保存，實驗前放入37℃預(yù)熱。未加血清液體培養(yǎng)基有效期為12個月。液體培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺會隨著儲存時間的延長而慢慢分解。如果細(xì)胞生長不良，可以再添加適量L-谷氨酰胺。

干粉培養(yǎng)基保存

4℃冰箱避光保存，有效期36個月。

血清

細(xì)胞培養(yǎng)液中添加的血清有牛血清、馬血清、人血清等，其中牛血清是zui常用的血清，分為胎牛、新生牛和小牛血清。胎牛血清是從母牛破腹取出的胎牛中分離出的血清，價格昂貴。新生牛血清是從剛出生的尚未哺乳的小牛中分離出來的血清，如廠家能做到這一點(diǎn)，新生小牛血清的質(zhì)量與胎牛血清的質(zhì)量相差不大。小牛血清，如小牛出生后已哺乳，從這種小牛中取出的血清中可能含有較多的生物活性物質(zhì)，其質(zhì)量明顯不如前兩種。

血清的質(zhì)量，種類及使用的濃度都有可能影響細(xì)胞的生長，而不同批次的血清支持細(xì)胞生長的能力也不同，尤其是對克隆細(xì)胞的生長，某些批次血清可能含有毒性或抑制細(xì)胞生長的物質(zhì)。因此，在購買大量血清之前，必須對血清支持細(xì)胞生長能力進(jìn)行檢測，然后再大量購買質(zhì)量好的同一批號的血清，并注意以下幾點(diǎn)：

（1）需要長期保存的血清必須儲存于-20℃–-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10％，因此，血清在凍入低溫冰箱前，必須預(yù)留一定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。

（2）一般廠商提供的血清為無菌，無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾，切勿直接過濾血清。

（3）瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法：-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃ 進(jìn)入37℃解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。

（4）熱滅活是指56℃, 30 分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分（complement）滅活。除非必須，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參與反應(yīng)有：細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺, 增強(qiáng)吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。

（5）切勿將血清在37℃放置太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中的有效成分會破會而影響血清質(zhì)量。

（6）血清中的沉淀物絮狀物：主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成，這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量?？捎秒x心3000rpm, 5 分鐘去除，也可不用處理。

（7）顯微鏡下“小黑點(diǎn)”：經(jīng)過熱處理過的血清，沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象“小黑點(diǎn)”，常誤認(rèn)為血清受污染。一般情況下，此小黑點(diǎn)不會影響細(xì)胞生長，但如果懷疑血清質(zhì)量，則應(yīng)立即停止使用，更換另一批號的血清。

 

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