產(chǎn)品名稱：人結(jié)腸癌細胞奧沙利鉑耐藥株HCT116/L 

貨號：QS-A005

細胞規(guī)格：1-3×10^6細胞量

庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨

培養(yǎng)液：85% RPMI1640+15%FBS+5ug/mL 奧沙利鉑

凍存條件：80%*培養(yǎng)液+10%FBS+10%DMSO

運輸方式：常溫順豐運輸和干冰順豐運輸

貨 期：復(fù)蘇細胞需要1-2周，凍存細胞的需要3-5天（特殊情況會有說明）

質(zhì) 控：無支原體、無污染、符合標(biāo)準

研究范圍：僅供科研使用

人結(jié)腸癌細胞奧沙利鉑耐藥株HCT116/L

我司是一家專注于生命科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè)，在廣大用戶的幫助和支持下，經(jīng)過不懈的努力，已成為國內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一，一站式采購商城，代理亞洲、歐美國家300多種品牌，200萬種以上產(chǎn)品。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國，在同行獲得*。

我司主要經(jīng)營產(chǎn)品是國內(nèi)傳代細胞和細胞培養(yǎng)相關(guān)的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無外泌體血清等高品質(zhì)血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒等產(chǎn)品。售后完善，我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購！

我司以客戶為核心，以產(chǎn)品質(zhì)量求生存，以售后服務(wù)求信譽。我們通過不斷改進來提高效率，絕不以犧牲品質(zhì)作為代價。“誠信、創(chuàng)新、嚴謹、專業(yè)”愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作，共創(chuàng)輝煌！

一、客戶收到細胞后需注意事項：

1、收到細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯(lián)系。

2、收到細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。由于運輸途中的影響，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。

3、收到細胞后，請顯微鏡下觀察細胞，用恰當(dāng)方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的*培養(yǎng)液，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以提高5％去培養(yǎng)。若細胞達到80%左右，血清濃度按照說明書要求進行調(diào)配。

4、收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)，懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。

5、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。

6、24小時后，細胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘?？梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經(jīng)驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。

7、貼壁細胞，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2 培養(yǎng)。    

    二、培養(yǎng)注意事項：

　　1、實驗進行前，無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進行下一個細胞系的操作。

　　2、無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70% ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在抬面之中央無菌區(qū)域，勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。

　　3、工作人員應(yīng)注意自身之安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

三、培養(yǎng)的相關(guān)知識：

1、在細胞凍存時加入溫保護劑，能大大提高凍存效果。常用的低溫保護劑是DMSO，它是一種滲透性保護劑，可迅速透入細胞，提高胞膜對水的通透性，降低冰點，延緩凍結(jié)過程，能使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外，在胞外形成冰晶，減少胞內(nèi)冰晶，從而減少冰晶對細胞的損傷。

2、細胞的凍存：先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。接著置于-20℃冰箱，約30-60min。再接著置于-80℃超低溫冰箱中放置，置于液氮罐中長期保存。同時做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。細胞的凍存和復(fù)蘇應(yīng)遵守慢凍快融的原則。

    我公司所提供的實驗細胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。我公司細胞研究中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于當(dāng)時的技術(shù)條件，中心不保證其準確性，從文獻等處引用的信息本中心未進行核實，僅供參考，使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任，采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。本公司所有細胞入庫之前均經(jīng)過嚴格的細胞質(zhì)量檢測和鑒定，所有細胞在出庫之前均經(jīng)過一次嚴格的質(zhì)檢認證，確保細胞到每一位用戶手里都是*狀態(tài)。我司匯集了一批專業(yè)的細胞生物學(xué)技術(shù)人員，以*的技術(shù)支撐產(chǎn)品，歡迎廣大用戶選購。

 

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