PAN胎牛血清是我們進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)過程種會用到的一種輔助材料,血清滅活是指在56℃的環(huán)境溫度種對已經(jīng)*解凍的血清進(jìn)行30分鐘的加熱操作,這是細(xì)胞培養(yǎng)過程中很多人都十分感興趣的話題,但是卻一頭霧水,今天蘇州千舍生物科技有限公司針對這個問題給你一次性解答。
1、細(xì)胞培養(yǎng)過程總加入的血清必須要進(jìn)行滅活操作嗎?
蘇州千舍:不是必須的,要根據(jù)具體的實驗要求判定血清是否要進(jìn)行滅活操作。
2、PAN胎牛血清滅活的條件是56℃ 30分鐘嗎?
蘇州千舍:如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細(xì)胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子。 但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補體受體的細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞,血清是 需要滅活,一般是56℃,30min。
3、胎牛血清在做滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)要進(jìn)行滅活嗎?
蘇州千舍:進(jìn)口的一般都已滅活,國產(chǎn)的不一定,滅活之后使用會更安全。
4、病毒上清轉(zhuǎn)染細(xì)胞,培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎?血清中的補體和抗體會不會被傳染?
蘇州千舍:血清一定要滅活,可以先用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時以后再加血清。避免雜蛋白對病毒和宿主結(jié)合過程的干擾,一般是2-6小時,根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)決定。這要根據(jù)實際情況而定,如果沒有把握那就滅活吧,也不麻煩56度半個小時。
5、胎牛血清直接解凍后就可以加入到培養(yǎng)基中是嗎?
蘇州千舍:常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間, 而時間則從15分鐘到60分鐘不等。其中常用的手法是56℃熱處理30 分鐘。隨著血清采集、處理、加工工藝的提高 ,許多早先認(rèn)為是熱滅活的原因已經(jīng)不再成立,只有少數(shù)對血清進(jìn)行熱滅活的研究者在實驗中證實了這一步驟的有效性和必要性。在正常的操作下,熱滅活通常對細(xì)胞的生長沒有明顯的促進(jìn)作用。同時還要考慮血清滅活與否對后續(xù)的實驗有沒有影響。
6、分裝后的PAN胎牛血清從-20℃取出放4℃讓其液化,卻見血清比較混濁,有沉淀產(chǎn)生,這屬正常嗎?
蘇州千舍:正常。