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有下列情況者,對血清內(nèi)毒素應(yīng)格外留意篩選:
1.養(yǎng)干細胞時,干細胞對內(nèi)毒素非常敏感,如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。
2.養(yǎng)免疫細胞時,過高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。
3.基因敲除相關(guān)的細胞實驗,培養(yǎng)的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實驗結(jié)果“失之毫厘,謬以千里"。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時,選擇極低的內(nèi)毒素(最好≤1EU/ml),對實驗至關(guān)重要;
4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細胞轉(zhuǎn)染,或者肝細胞、神經(jīng)細胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細胞的擴增,這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此,挑選更低的內(nèi)毒素,是保證實驗順利的第一步。
5.實驗室有些細胞,需要長期培養(yǎng)、長期凍存,或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會經(jīng)?;蜷L時間作用于細胞。為保證細胞的健康,都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清,以避免內(nèi)毒素長久對細胞的毒性影響。
總之,血清中內(nèi)毒素含量過高,更容易導(dǎo)致細胞“亞健康",造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn),或細胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡,導(dǎo)致試驗中斷失敗。血清中的內(nèi)毒素越低越好。
全球細胞培養(yǎng)學(xué)會均依據(jù)內(nèi)毒素對血清的品質(zhì)進行分級和命名。
內(nèi)毒素含量越低的血清,級別就越高,以胎牛血清為例:
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清;
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時,此血清為標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清;
各種類型的胎牛血清的用途是什么?
★ 我們需要知道都有哪些種類的牛血清和它們的用途:
1、透析血清
分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)定特定成分進行研究的實驗中。
2、碳吸附血清
使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質(zhì),如某些激素、細胞因子、生長因子等,去除作用對分子量大小并無區(qū)分。碳吸附胎牛血清常用于體外培養(yǎng)研究驗證激素的作用效果。
3、去外泌體血清
適用于收集細胞分泌的外泌體時使用。
4、低IgG血清
用于研究抗體、病毒和病毒反應(yīng)、細胞表面抗原表位。
5、四環(huán)素血清
應(yīng)用于使用敏感四環(huán)素誘導(dǎo)表達系統(tǒng)的細胞培養(yǎng)(Tet-on, Tet-off),以及其它對四環(huán)素敏感的實驗中。
6、IR (輻照)
鈷60伽馬輻照劑量在3.5Mrad. 通過直接與間接作用將生物大分子(如核酸)鍵結(jié)破壞,人畜用藥物/疫苗,及對微生物負荷(Bioburden)要求水平的實驗。
7、HI (熱滅活)處理血清
56℃, 30Min, 破壞補體,確保細胞與抗體結(jié)合不會發(fā)生裂解。
8、胚胎干細胞(ES)專用血清
是從多個批次的胎牛血清篩選出特定批號,適用于人及小鼠胚胎干細胞、成體干細胞及原代細胞長期培養(yǎng)。
9、間充質(zhì)干細胞(MSC)專用血清
從多個批次的胎牛血清篩選出特定批號,經(jīng)過骨髓,脂肪組織及臍帶來源的間充質(zhì)干細胞的細胞活性嚴格測試,通過傳代及分化比例測試。
其他動物血清
10、馬血清
10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應(yīng)答, 常與牛血清結(jié)合或單獨作為哺乳動物細胞培養(yǎng)的補充培養(yǎng)基。
11、豬血清
豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細胞培養(yǎng), 疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體), 中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒(AAV), 用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化, 作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。
12、兔血清
正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對照。在免疫組織化學(xué)和免疫細胞化學(xué)方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。
13、羊血清
用于生物醫(yī)學(xué)研究的大多數(shù)細胞系和原代培養(yǎng)物上,F(xiàn)BS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學(xué)研究。
用作魚類細胞培養(yǎng)的有效NBCS替代物。
可成功地代替胎牛血清在生長培養(yǎng)基中長期用于環(huán)孢蘑菇的體外繁殖。
WINSERA®胎牛血清 | 貨號 | 規(guī)格 | 庫存狀態(tài) |
優(yōu)級 | FBS500-WS-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
特級 | FBS500-WP-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
ES級別 | FBS500-WE-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
無外泌體血清 | FBS050-EXO | 50ML | 現(xiàn)貨 |
WINSERA®特級胎牛血清適合培養(yǎng)哪些細胞?
1、特級胎牛血清具有非常越的促細胞生長能力,適合培養(yǎng)腫瘤細胞,原代細胞,部分干細胞和嬌貴細胞。
2、血清如何保存, 可以放多久?
3、貯藏溫度≤-15℃,可長時間保存; 4℃存放時,請勿超過一個月。
4、血清溶解以后,出現(xiàn)沉淀怎么辦?
5、若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400-600g離心5min,上清液即可加入培養(yǎng)基內(nèi)一起培養(yǎng)。 我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物, 一方面它可能會阻塞您的過濾膜;另一方面,過濾血清這種行為可能會導(dǎo)致血清中部分營養(yǎng)成分的流失。