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細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)
?復(fù)蘇時(shí)動(dòng)作要快,盡量減少胞內(nèi)形成冰晶,影響復(fù)蘇后細(xì)胞活率。
? 融化時(shí)盡量不要碰到管口,以免容易造成污染。
?若一次性需要復(fù)蘇細(xì)胞很多,可以分批水浴解凍,防止傳熱不佳使得細(xì)胞融化時(shí)間延長(zhǎng)。
?若需要同時(shí)復(fù)蘇好幾種細(xì)胞,提前在離心管和培養(yǎng)瓶上做好標(biāo)記,或記住自己擺放的位置,不要弄混亂。
4、何判定細(xì)胞是否發(fā)生支原體污染:可以選用直接培養(yǎng)法、熒光染色或PCR方法檢測(cè),比較常用的是PCR。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生支原體污染時(shí),原則上是能夠去除支原體的,但是整個(gè)過(guò)程耗時(shí)耗力,還要考驗(yàn)個(gè)人操作能力。所以如果不是處于細(xì)胞存量很少的情況下,建議發(fā)現(xiàn)污染時(shí)立刻棄掉,重新培養(yǎng)。
5、如果孵箱中只是某種細(xì)胞持續(xù)性大量死亡,而其他細(xì)胞狀態(tài)都沒(méi)問(wèn)題的話,基本上可以確定就是孵箱存在特異性感染這類(lèi)細(xì)胞的真菌或細(xì)菌,遇到這種情況,小六兒也不知道該怎么做,只能是先停一段時(shí)間看看。。。。。。
5、其他注意事項(xiàng):每個(gè)星期都要更換孵箱底盤(pán)中的水(紫外照射后超純水);每?jī)芍芟疽淮畏跸洌?/span>75%酒精擦拭一遍后,再用0.1%新潔爾滅擦拭一遍(都用超純水配制);可以在孵箱底部放一個(gè)燒杯,里面放入飽和硫酸銅,可以抑制霉菌生長(zhǎng)。不過(guò)也有人說(shuō)硫酸銅會(huì)改變孵箱的PH值,如果不是孵箱污染的情況很?chē)?yán)重,建議不要使用。