進口特級胎牛血清的正確存放與解凍是各位實驗家尤為關(guān)注的一個問題,
1、血清必須貯存-20℃,如存放于4℃,請勿超過兩周,對于某些單位一次無法用完一瓶,可在無菌條件下將其40-45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清解凍時體積會增加10%,必須預(yù)留此膨脹體積的空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂的情形。
2、一般公司所提供的血清一般為100ml和500ml裝量,因此建議在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清:-20℃→4℃冰箱或冷庫溶解24小時→室溫下全溶后再分裝,一般以50 ml無菌離心管中分裝40-45ml。使用過程中要特別注意,必須規(guī)則地將血清搖晃均勻,小心勿造成氣泡,使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由-20℃放置至37℃環(huán)境下解凍,因為溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而產(chǎn)生沉淀。
3、血清的滅活一般是指56℃,30分鐘水浴加熱已*解凍的血清,加熱過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。此處理的目的是使血清中的補體成分去活化。但是,經(jīng)過滅活處理的血清會因而造成沉淀的顯著增多,且會影響血清的品質(zhì)。所以,有的公司所生的細(xì)胞培養(yǎng)用牛血清不做滅活處理,由客戶自行選擇。而診斷試劑用血清在除菌過濾前進行過滅活處理。
4、在使用血清的時候,勿將血清留置于37℃太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分會因而受到破壞,影響血清的品質(zhì)。
5、一般我們在使用過程中是先過濾培養(yǎng)基,再加血清,勿直接過濾血清。
綜上所述,您是不是已經(jīng)對關(guān)于特級胎牛血清使用的方法,有所了解。