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蘇州千舍生物教你六招使用ELISA試劑盒
更新時間:2020-04-03 點擊量:1392

蘇州千舍生物教你六招使用ELISA試劑盒

一、實驗原理

    用于免疫酶技術(shù)的酶有很多,如過氧化物酶,堿性磷酸酯酶,β-D-半乳糖苷酶,葡萄糖氧化酶,碳酸酐酶,乙酰膽堿酯酶,6-磷酸葡萄糖脫氧酶等。常用于ELISA法的酶有辣根過氧化物酶,堿性磷酸酯酶等,其中尤以辣根過氧化物酶為多。由于酶摧化的是氧化還原反應(yīng),在呈色后須立刻測定,否則空氣中的氧化作用使顏色加深,無法準(zhǔn)確地定量。 
     辣根過氧化物酶(HRP)是一種糖蛋白,每個分子含有一個氯化血紅素(protonhemin)區(qū)作輔基。酶的濃度和純度常以輔基的含量表示。氯化血紅素輔基的大吸收峰是403nm,HRP酶蛋白的吸收峰是275nm,所以酶的濃度和純度計算式是(已知HRP的A(1cm 403nm 1%)=25,式中1%指HRP百分濃度為100ml含酶蛋白1g,即10mg/ml,所以,酶濃度以 mg/ml 計算是HRP的A(1cm 403nm mg/ml=2.5)HRP純度(RZ)=A403nm/A275nm純度RZ(Reinheit Zahl)值越大說明酶內(nèi)所含雜質(zhì)越少。高純度HRP的RZ值在3.0左右,高可達3.4。用于ELISA檢測的HRP的RZ值要求在3.0以上。 

   我司主要銷售細胞培養(yǎng)試劑,胎牛血清、人血清、人AB血清、培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、sigma試劑、試劑盒等優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品,對售出去的產(chǎn)品,售后完善。

  說到ELISA試劑盒,相信科研朋友們都不會陌生。ELISA試劑盒的誕生,是為了幫助科研工作者省掉繁瑣的實驗過程,提高科研效率。如果選對了試劑盒,用對了實驗技巧,就會讓您的實驗效率事半功倍。將為您解析ELISA試劑盒六大使用技巧,請收下!

1、查找待測樣本的蛋白濃度:可以通過NCBI的文獻,uniprot,pax-dab上給出的蛋白表達量參考值來比較ELISA試劑盒中給出的樣本值與報道值是否一致;

2、試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測樣本的種類:除試劑盒特別說明外,一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有:血清和血漿(不同抗凝劑),細胞上清,和細胞裂解液,試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用;

3、試劑盒的檢測范圍:也就是標(biāo)曲范圍,特別要注意待測樣本濃度是否落在標(biāo)曲范圍內(nèi),對于濃度很高的樣本,可以先進行預(yù)實驗摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測定樣本。

Hyclone胎牛血清SH30084.03  、Hyclone胎牛血清SH30406.02  、Hyclone胎牛血清SH30406.05 、Hyclone胎牛血清SH30396.03  、Hyclone胎牛血清SH30070.03、Hyclone胎牛血清 SH30370.03  、活性炭/葡聚糖胎牛血清 SH30068.03 、馬血清SH30074.03 、烏拉圭胎牛血清 SV30087. 03 、Hyclone胎牛血清SH30071.03 、Hyclone胎牛血清SV30160.03。

BOVOGEN胎牛血清 SFBS 、BOVOGEN新生牛血清 SNCS。

BI優(yōu)等胎牛血清 04-001-1ACS 、BI ES級別胎牛血清 04-002-1A 、

BI 間充質(zhì)胎牛血清 04-400-1A 。

PAN胎牛血清FBS P30-3302  、PAN胎牛血清FBS ST30-3302 、PAN ES級別胎牛血清 ST30-2602 、PAN胎牛血清Plus ST30-3302P 。

NTC優(yōu)等胎牛血清 SFBE。

Gemini優(yōu)等胎牛血清 900-108 、Gemini特級胎牛血清 100-500  、Gemini科研用人AB血清100-512 。

SBI 無外泌體血清 EXO-FBS-50A-1、雙抗15140-122、SV30010  、胰酶 25200-056、SH30042.01 、GIBCO 胰酶 25200-072。

4、試劑盒中的稀釋線性及回收率:

A、稀釋線性一般指樣本稀釋線性,是將樣本梯度稀釋下來,看各稀釋梯度濃度是否成線性,參考樣本稀釋線性可以選擇樣本的稀釋倍數(shù);

B、稀釋線性也有做加標(biāo)稀釋線性的情況,加標(biāo)稀釋線性是將標(biāo)準(zhǔn)品加入樣本中測定加入的標(biāo)準(zhǔn)品濃度測定是否準(zhǔn)確,同樣也是確定待測樣本稀釋倍數(shù)的參考指標(biāo)。一般線性和回收率的范圍在80%-120%比較合適;

5、試劑盒的其它指標(biāo):

A、靈敏度:試劑盒能夠檢測到的樣本zui低濃度的能力,如果待檢指標(biāo)含量很低,需要選擇高靈敏度的ELISA試劑盒;

B、板間和板內(nèi)的變異系數(shù)(CV%):反映板內(nèi)和不同板之間是否均勻,CV%一般小于10% 比較好。

6、試劑盒的有效期:試劑盒的有效期一般是半年至一年,樣本準(zhǔn)備時間需要考慮到試劑盒的有效期。

    我公司ELISA試劑盒,均經(jīng)過充分測試,以保證*的品質(zhì)和可重復(fù)性。這種即用型的ELISA試劑盒,含有ELISA實驗所需的全部試劑和耗材,并通過精心挑選抗體對,及優(yōu)化配方稀釋液,確保結(jié)果具有無以倫比的準(zhǔn)確性。如果您對我公司的胎牛血清、人血清、人AB血清、無外泌體血清SBI、新生牛血清等產(chǎn)品感興趣,歡迎咨詢訂購!